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ELISA試劑盒特點(diǎn):
1、靈敏度高,數(shù)據(jù)準(zhǔn)確,操作簡單
2、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
3、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
4、適用血液,尿,糞便,腦脊液,胸腹水,前列腺液,精液,等多種標(biāo)本
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ELISA試劑盒北京質(zhì)量好,北京哪家賣,北京冬歌促銷特賣優(yōu)勢:全面 —— 混合 8 種不同的常見抗原,對自身免疫性疾病進(jìn)行全面篩查。快速 —— 檢測時間短( ~2 小時),確診時間更早。準(zhǔn)確 ——ELISA 檢測方法,靈敏度高,特異性強(qiáng),適用性好。質(zhì)優(yōu) —— 美國技術(shù)開發(fā),高品質(zhì)及高可靠性的分析性能。價低 —— 國內(nèi)自生產(chǎn),符合國內(nèi)實(shí)情,降低生產(chǎn)成本。
我們將著力提升員工的素質(zhì),打造更加專業(yè)更加高效的團(tuán)隊(duì),堅持“以質(zhì)量求生存,以信譽(yù)求發(fā)展"的原則,全方位提升客戶的滿意度。本公司的ELISA試劑盒,質(zhì)量可靠,靈敏度好,我們可提供免費(fèi)代測服務(wù),全國包郵,到貨周期快。北京冬歌生物鄭重承諾:凡在本公司購買的產(chǎn)品如有任何質(zhì)量問題,我們進(jìn)行免費(fèi)退換。本公司的ELISA試劑盒,質(zhì)量可靠,靈敏度好,我們可提供免費(fèi)代測服務(wù),全國包郵,到貨周期快。根據(jù)客戶的購買情況公司還會有不同的優(yōu)惠政策,更多詳細(xì)信息請聯(lián)系我們的在線銷售人員!
F2304-B | 人ANG-1elisa試劑盒 |
F2305-A | 人血管生長素(ANG)elisa試劑盒 |
F2305-B | 人ANGelisa試劑盒 |
F2306-A | 人角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)elisa試劑盒 |
F2306-B | 人KAF/ARelisa試劑盒 |
F2307-A | 人血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)elisa試劑盒 |
規(guī) 格 (48T/96T)
樣品類型 血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清等樣品類型
檢測方法 酶聯(lián)免疫法
特 異 性 公司elisa試劑盒具有較高的靈敏度和出色的特異性
交叉反應(yīng) 由于當(dāng)前的酶聯(lián)免疫科學(xué)技術(shù)和知識有限,現(xiàn)有技術(shù)不可能完成藥物檢測的靶抗原之間和所有其他物種的類似物。因此,交叉反應(yīng)可能仍然存在
樣 本 量 50-100 μL
實(shí)驗(yàn)時間 1–4.5h
儲存條件 2-8°C
儲存方法 可以存儲在2 - 8°C長達(dá)1個月(專家建議:4°C恒溫保存,酶免試劑盒實(shí)驗(yàn)效果更佳)。對于長期存儲,請在-20°C的存儲。盡量保持試驗(yàn)板在密封鋁箔袋,避免潮濕
有 效 期 6 months
工作原理人血管生成素1ELISA試劑盒的原理 ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標(biāo)本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測定方法達(dá)到很高的敏感度。
產(chǎn)品選型人血管生成素1ELISA試劑盒的類型 ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有三個必要的試劑:(1)固相的抗菌素原或抗體,即"免疫吸附劑"(immunosorbent);(2)酶標(biāo)記的抗原或抗體,稱為"結(jié)合物"(conjugate);(3)酶反應(yīng)的底物。根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的情況以及檢測的具體條件,可設(shè)計出各種不同類型的檢測方法。用于臨床檢驗(yàn)的ELISA主要有以下幾種類型:
雙抗體夾心法測抗原
操作流程雙抗體夾心法是檢測抗原最常用的方法,操作步驟如下:1) 將特異性抗體與固相載體聯(lián)結(jié),形成固相抗體。洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。2) 加受檢標(biāo)本,保溫反應(yīng)。標(biāo)本中的抗原與固相抗體結(jié)合,形成固相抗原抗體復(fù)合物。洗滌除去其他未結(jié)合物質(zhì)。3) 加酶標(biāo)抗體,保溫反應(yīng)。固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合。徹底洗滌未結(jié)合的酶標(biāo)抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標(biāo)本中受檢抗原的量相關(guān)。4) 加底物顯色。固相上的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。通過比色,測知標(biāo)本中抗原的量。在臨床檢驗(yàn)中,此法適用于檢驗(yàn)各種蛋白質(zhì)等大分子抗原,例如HBsAg、HBeAg、AFP、hCG等。只要獲得針對受檢抗原的異性抗體,就可用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物而建立此法。如抗體的來源為抗血清,包被和酶標(biāo)用的抗體最好分別取自不同種屬的動物。如應(yīng)用單克隆抗體,一般選擇兩個針對抗原上不同決定簇的單抗,分別用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物。這種雙位點(diǎn)夾心法具有很高的特異性,而且可以將受檢標(biāo)本和酶標(biāo)抗體一起保溫反應(yīng),作一步檢測! ≡谝徊椒y定中,當(dāng)標(biāo)本中受檢抗原的含量很高時,過量抗原分別和固相抗體及酶標(biāo)抗體結(jié)合,而不再形成"夾心復(fù)合物"。類同于沉淀反應(yīng)中抗原過剩的后帶現(xiàn)象,此時反應(yīng)后顯色的吸光值(位于抗原過剩帶上)與標(biāo)準(zhǔn)曲線(位于抗體過剩帶上)某一抗原濃度的吸光值相同(參見1.3.2,圖1-4),如按常法測讀,所得結(jié)果將低于實(shí)際的含量,這種現(xiàn)象被稱為鉤狀效應(yīng)(hook effect),因?yàn)闃?biāo)準(zhǔn)曲線到達(dá)高峰后呈鉤狀彎落。鉤狀效應(yīng)嚴(yán)重時,反應(yīng)甚至可不顯色而出現(xiàn)假陰性結(jié)果。因此在使用一步法試劑測定標(biāo)本中含量可異常增高的物質(zhì)(例如血清中HBsAg、AFP和尿液hCG等)時,應(yīng)注意可測范圍的最高值。用高親和力的單克隆抗體制備此類試劑可削弱鉤狀效應(yīng)! 〖偈乖诒粶y分子的不同位點(diǎn)上含有多個相同的決定簇,例如HBsAg的a決定簇,也可用針對此決定的同一單抗分別包被固相和制備酶結(jié)合物。但在HBsAg的檢測中應(yīng)注意亞型問題,HBsAg有adr、adw、ayr、ayw4個亞型,雖然每種亞型均有相同的a決定簇的反應(yīng)性,這也是用單抗作夾心法應(yīng)注意的問題。 雙抗體夾心法測抗原的另一注意點(diǎn)是類風(fēng)濕因子(RF)的干擾。RF是一種自身抗體,多為IgM型,能和多種動物IgG的Fc段結(jié)合。用作雙抗體夾心法檢測的血清標(biāo)本中如含有RF,它可充當(dāng)抗原成份,同時與固相抗體和酶標(biāo)抗體結(jié)合,表現(xiàn)出假陽性反應(yīng)。采用F(ab')或Fab片段作酶結(jié)合物的試劑,由于去除了Fc段,從而消除RF的干擾。雙抗體夾心法ELISA試劑是否受RF的影響,已被列為這類試劑的一項(xiàng)考核指標(biāo)。 雙抗體夾心法適用于測定二價或二價以上的大分子抗原,但不適用于測定半抗原及小分子單價抗原,因其不能形成兩位點(diǎn)夾心。
安裝要求人血管生成素1ELISA試劑盒樣品要求
·客戶需提供待檢測抗體和包被用抗原。
·檢測的樣本為細(xì)胞培養(yǎng)上清、人和動物的血清、血漿。
·樣本收集后應(yīng)立即-20℃保存,若長期保存應(yīng)-70℃。
·樣本量的要求:若一個指標(biāo)做復(fù)孔檢測應(yīng)不少于250ul,做單孔檢測應(yīng)不少于120ul。建 議若客戶樣本量充足最好提供500ul以上。
·客戶的樣本收集后,立即按要求保存,切忌反復(fù)凍融。外地客戶郵寄需要用干冰運(yùn)輸。郵寄前請與技術(shù)支持溝通確認(rèn)。
小鼠單克隆抗體Ig類/亞類鑒定ELISA試劑盒CL0150 現(xiàn)貨供應(yīng),廠家直銷付款方式:可以通過銀行轉(zhuǎn)帳,支付寶
上海一基實(shí)業(yè)有限公司主營國產(chǎn)、進(jìn)口(免費(fèi)代測樣品)ELISA試劑盒,低溫恒溫槽,制冰機(jī),折光儀,對照品,標(biāo)準(zhǔn)品,生化試劑,細(xì)胞,血清,抗體,生物試劑,培養(yǎng)基等產(chǎn)品。小鼠單克隆抗體Ig類/亞類鑒定ELISA試劑盒CL0150 免費(fèi)快遞送貨上門。!
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小鼠單克隆抗體Ig類/亞類鑒定ELISA試劑盒CL0150
人胎兒血紅蛋白(HBF)elisa試劑盒 參數(shù):
編號 | 中文名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
F3421-A | 人胎兒血紅蛋白(HBF)elisa試劑盒 | Human fetal hemoglobin,HBF elisa Kit | 48T |
編號 | 中文名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
F3421-A | 人胎兒血紅蛋白(HBF)elisa試劑盒 | Human fetal hemoglobin,HBF elisa Kit | 48T |
人胎兒血紅蛋白(HBF)elisa試劑盒 廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中,我們來介紹一下更簡便的操作說明,編號:F3421-A,英文名稱Human fetal hemoglobin,HBF elisa Kit
1、人胎兒血紅蛋白(HBF)elisa試劑盒 操作方法一用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:(1).包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。 (2).加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。 (3).加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時,洗滌。 (4).加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。 (5).終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。 (6).結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
2、人胎兒血紅蛋白(HBF)elisa試劑盒 操作方法二:用于檢測未知抗體的間接法: (1).用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜。次日洗滌3次。 (2).加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)(3).于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,最后一遍用DDW洗滌。 (4).于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘 (5).于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml (6).可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。 ELISA是一種敏感性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法,由于其試劑穩(wěn)定、易保存、操作簡便、結(jié)果判斷較客觀等因素,以及既適宜于大規(guī)模篩查試驗(yàn)又可以用于少量標(biāo)本的檢測,既可以做定性試驗(yàn)也可以做定量分析等優(yōu)點(diǎn),已廣泛應(yīng)用于微生物學(xué)、寄生蟲學(xué)、腫瘤學(xué)和細(xì)胞因子等領(lǐng)域。
3、臨床標(biāo)本的收集和保存 用于ELISA測定的臨床標(biāo)本最為常用的是血清(漿),有時因?yàn)樘囟ǖ臋z測目的,也用到唾液、腦脊液、尿液、糞便等標(biāo)本。目前臨床上使用血清標(biāo)本測定的標(biāo)志物一般有傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標(biāo)志物、激素、特種蛋白、細(xì)胞因子和治療藥物等。對用于激素和治療藥物測定的血清標(biāo)本的收集,要注意收集時間甚或體位有可能會對測定結(jié)果產(chǎn)生影響。如可的松在早晨4~6點(diǎn)之間,會有一峰值出現(xiàn):生長激素、促黃體激素(LH)和促卵泡激素(FSH)均以陣發(fā)性方式釋放,因此,在測定此類激素時,有必要在密切相連的時間間隔內(nèi)采取數(shù)份血樣本,以其中間值為測定值。又如當(dāng)從臥位變?yōu)檎玖⑽粫r,血清中腎素活性將出現(xiàn)明顯增高。再如治療藥物的檢測,應(yīng)根據(jù)藥代動力學(xué)選擇服藥后的最適時間抽血檢測。用于傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標(biāo)志物和特種蛋白等的檢測的血清標(biāo)本的收集則沒有時間和體位方面的影響,只是在處理和保存方面要考慮。
(1)要注意避免出現(xiàn)嚴(yán)重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán),其有類似過氧化物的活性,因此,在以HRP為標(biāo)記酶的ELISA測定中,如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高,則其就很容易在溫育過程中吸附于固相,從而與后面加入的HRP底物反應(yīng)顯色。(2)樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細(xì)菌污染,一則細(xì)菌的生長,其所分泌的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用;二則一些細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會對用相應(yīng)酶作標(biāo)記的測定方法產(chǎn)生非特異性干擾。(3)血清標(biāo)本如是以無菌操作分離,則可以在2~8℃下保存一周,如為有菌操作,則建議冰凍保存。樣本的長時間保存,應(yīng)在-70℃以下。(4)冰凍保存的血清標(biāo)本須注意避免因停電等造成的反復(fù)凍融。標(biāo)本的反復(fù)凍融所產(chǎn)生的機(jī)械剪切力將對標(biāo)本中的蛋白等分子產(chǎn)生破壞作用,從而引起假陰性結(jié)果。此外,凍融標(biāo)本的混勻亦應(yīng)注意,不要進(jìn)行劇烈振蕩,反復(fù)顛倒混勻即可。(5)標(biāo)本在保存中如出現(xiàn)細(xì)菌污染所致的混濁或絮狀物時,應(yīng)離心沉淀后取上清檢測。
4、試劑準(zhǔn)備 在臨床實(shí)驗(yàn)室,對試劑準(zhǔn)備一般不太注意,通常的做法是,在實(shí)驗(yàn)時將試劑從冰箱中拿出來即用,而忽略了這種做法有可能影響后面溫育時間不夠的問題,其直接的后果是對一些弱陽性標(biāo)本的檢測出現(xiàn)假陰性。因此在ELISA測定中試劑的準(zhǔn)備最為關(guān)鍵的是,在實(shí)驗(yàn)開始前,將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20分鐘以上后,再進(jìn)行測定,以使試劑盒在使用前與室溫平衡。這樣做的目的,主要是為了在后面的溫育反應(yīng)步驟中,能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度能較快地達(dá)到所要求的高度,以滿足測定要求。其次,目前的商品ELISA試劑盒中的洗板液均需在實(shí)驗(yàn)室使用時對所提供的濃縮液稀釋配制,因此稀釋時所用的蒸餾水或去離子水應(yīng)保證質(zhì)量。此外,當(dāng)試劑盒以O(shè)PD為底物時,則底物溶液應(yīng)在反應(yīng)顯色前臨時配制。
在現(xiàn)在的ELISA商品試劑盒中,血清樣本的加入幾乎是唯一的要使用微量加樣器加入樣本的步驟。使用微量加樣器加樣必須注意的關(guān)鍵點(diǎn)是:加樣不可太快,要避免加在孔壁上部,不可濺出和產(chǎn)生氣泡。加樣太快,無法保證微量加樣的準(zhǔn)確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區(qū),易導(dǎo)致非特異吸附。濺出會對鄰近孔產(chǎn)生污染。出現(xiàn)氣泡則反應(yīng)液界面有差異。試劑的加入在國產(chǎn)試劑盒中基本上均是從滴瓶中滴加,除了要注意滴加的角度外,滴加的速度也很重要,滴加太快,很容易出現(xiàn)重復(fù)滴加或加在兩孔之間的現(xiàn)象,這樣就會在孔內(nèi)的非包被區(qū)出現(xiàn)非特異吸附,從而引起非特異顯色。所以,有時候一份標(biāo)本用相同的試劑盒這次測定為陽性,下次測定為陰性,往往就是上述加樣及試劑的錯誤所致。
四、溫育溫育是ELISA測定中影響測定成敗最為關(guān)鍵的一個因素。ELISA作為一種固相免疫測定,抗原抗體的結(jié)合反應(yīng)在固相上進(jìn)行,要使液相中的抗原或抗體與固相上的特異抗體或抗原完全結(jié)合,必須在一定的溫度條件下反應(yīng)一定的時間。溫育所需時間與溫度成反比,即溫度越高,則所需時間相對較短。最為常用的溫育溫度有37℃和室溫,其次是43℃和2~8℃。溫育這一步是臨床ELISA測定中最容易出現(xiàn)問題的步驟。通常目前國內(nèi)ELISA商品試劑盒的反應(yīng)溫育時間為37℃ 30分鐘~1小時,進(jìn)口ELISA試劑盒則通常為37℃ 1~2小時才能有較完全的結(jié)合,低于1小時,可能會影響測定下限。因此,關(guān)于溫育,在實(shí)際測定操作中一定要注意以下幾點(diǎn):要保證在設(shè)定的溫度下有足夠的反應(yīng)時間。一般來說,加完樣本和/或反應(yīng)試劑后,將微孔板從室溫拿至水浴箱或溫箱中時,孔內(nèi)溫度從室溫升至37℃,需要一定的時間,尤其是在室溫比較低以及非水浴的狀態(tài)下,這段升溫時間可能還比較長,而在臨床實(shí)驗(yàn)室中,很少有人注意這個問題,通常是將微孔板一放入溫箱即開始計時,這樣就很容易造成實(shí)際測定中溫育時間不夠,弱陽性樣本測不出來的問題。曾有一地處南方的血站同行提出了一個問題,就是在每一年的冬季總有那么一個多月的時間,在做HBsAg測定的室內(nèi)質(zhì)控中,測定由衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心供應(yīng)的1 ng/ml弱陽性樣本時,總是測不出來,不知原因?yàn)楹?這可能就與南方冬天室內(nèi)溫度較低有關(guān),此時微孔板轉(zhuǎn)入溫箱后37℃溫育時間不夠,以致弱陽性樣本測定為陰性。因此,為保證37℃下足夠的溫育時間,臨床實(shí)驗(yàn)室可自行確定本實(shí)驗(yàn)室不同季節(jié)(不同室溫下)微孔板從室溫拿至溫箱后需要多長時間孔內(nèi)溫度才能達(dá)到37℃,從而適當(dāng)延長板條在溫箱中的放置時間。具體的做法是,用一小溫度計放置板孔反應(yīng)溶液中測量觀察即可。
人elisa試劑盒產(chǎn)品詳情如下:
ELISA試劑盒規(guī)格 | 48T | 96T | 保存 |
酶標(biāo)包被板 | 1X48 | 1X96 | 4℃/-20℃ |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 0.5ml X 1瓶 | 0.5ml X 1瓶 | 2℃-8℃ |
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1.5ml X 1瓶 | 1.5ml X 1瓶 | 2℃-8℃ |
酶標(biāo)試劑 | 3ml X 1瓶 | 3ml X 1瓶 | 2℃-8℃ |
樣品稀釋液 | 3ml X 1瓶 | 3ml X 1瓶 | 2℃-8℃ |
顯色劑A液 | 3ml X 1瓶 | 3ml X 1瓶 | 2℃-8℃ |
顯色劑B液 | 3ml X 1瓶 | 3ml X 1瓶 | 2℃-8℃ |
終止液 | 3ml X 1瓶 | 3ml X 1瓶 | 2℃-8℃ |
25倍濃縮洗滌液 | 20ml X 1瓶 | 20ml X 1瓶 | 2℃-8℃ |
封板膜 | 2片 | 2片 |
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密封袋 | 1個 | 1個 |
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說明書 | 1份 | 1份 |
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人elisa試劑盒是用于測定血清,血漿及相關(guān)液體樣本中總待測物質(zhì)的含量。本試劑盒應(yīng)用酶聯(lián)免疫ELISA檢測法測定標(biāo)本中待測物質(zhì)水平,用純化的待測物質(zhì)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入代測物質(zhì),再與HRP標(biāo)記的待測物質(zhì)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下變成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色,顏色的深淺和樣品中的待測物質(zhì)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物質(zhì)濃度。
人ELISA試劑盒數(shù)值計算:
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。
人ELISA試劑盒注意事項(xiàng):1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4.請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染,底物請避光保存。
6.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
8.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。
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E92045Hu,ELISA Kit for Survivin (Surv)
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中文名稱:人醛固酮(ALD)elisa試劑盒
英文名稱:Human Aldosterone ELISA Kit
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產(chǎn)品別名:猴生長停滯特異性蛋白6(Gas6)定量檢測試劑盒,猴生長停滯特異性蛋白6(Gas6)酶聯(lián)免疫分析試劑盒
英文縮寫:Gas6 Elisa Kit
規(guī)格96T/48T
存儲條件:2-8℃
有效期:6個月
特異性:本ELISA檢測試劑盒可同時檢測天然或重組的,且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。
檢測種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。
適用范圍:此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn),禁用于臨床
供應(yīng)猴生長停滯特異性蛋白6(Gas6)elisa試劑盒等ELISA試劑盒操作技術(shù)相關(guān)的注意事項(xiàng):
⑴ 嚴(yán)格按照供應(yīng)猴生長停滯特異性蛋白6(Gas6)elisa試劑盒說明書進(jìn)行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30~60min。
⑵ 加樣后及時放人孵箱。標(biāo)本較多時,要分批操作。按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗徹底。
(3)封板溫育時,各孔一定要封嚴(yán),防止陽性標(biāo)本的液體蒸發(fā),產(chǎn)生周邊現(xiàn)象從而導(dǎo)致“花板”的出現(xiàn)。
(4)用洗板機(jī)洗板時,保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后最好在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干:還要防止針口有纖維蛋白或異物,這些異物在洗板的過程中易產(chǎn)生拖帶現(xiàn)象而導(dǎo)致“花板”的出現(xiàn)。
(5)合理安排檢測量,以免反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。
(6)加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
(7)顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用。
(8)加樣時保持顯色劑不外流;A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
(9)應(yīng)保證C清潔,整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸。以上的措施可以使“花板”降至最低限度。從而提高檢測的特異性。并得到更準(zhǔn)確、可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
供應(yīng)猴生長停滯特異性蛋白6(Gas6)elisa試劑盒等潤裕生物ELISA試劑盒產(chǎn)品,原裝ELISA試劑盒以及各類國產(chǎn)ELISA試劑盒產(chǎn)品8折優(yōu)惠熱銷中,歡迎廣大科研學(xué)者前來選購: